货品编号： TOYOBO.KMM-201
品牌： TOYOBO
品名： KOD ONE TM PCR Mix-Blue
规格： 1 ml ×5支
用途
PCR
说明
该产品是以改良型KOD DNA polymerase（UKOD）为基础开发的PCR用2× Master Mix，兼具保真性好和扩增效率高的特点。 使用改进的延伸增强剂技术，可以实现超高速PCR反应:长度在1kb以内的片段仅需1秒， 1~10kb时延伸速度为5秒/kb，10kb及以上延伸速度为10秒/kb。该酶具有很高的反应成功率，针对含肌苷(dI)或尿嘧啶(dU)的引物模板或者粗体样品都能很好地进行扩增。此外，因为预添加了抑制酶活性和3`5`外切酶活性的单抗，可以进行高特异性的热启动PCR。 | |
特征
●高速PCR
| 延伸时间设为1秒即可扩增1kb的片段，10kb以内延伸速度为5秒/kb，高于10kb的片段设为10秒/kb，缩短延伸时间可大幅提高PCR实验的总耗时。 | |
●简便
除了引物和模板之外的PCR组分都包含在预混液中，简化了配液流程，同时也提高了实验的可重复性。此外，包含电泳指示剂的KODOneTMPCR Master Mix –Blue-(Code No. KMM-201)可以在PCR反应完成后直接点样，无需另外添加LoadingDye。
●超高的保真性保真性约为TaqDNA聚合酶的80倍，保持了KOD系列产品中保真性最高的水准
●粗样品也可高效扩增（实验例2）
●可以使用含肌苷(dI)或尿嘧啶(dU)的引物和模板（实验例5）
实验例
1. 高速PCR实验
以人基因组DNA为模板，可进行超快速PCR扩增。结果显示，KOD OneTMPCR Master Mix及KOD OneTMPCR Master Mix -Blue-扩增1kb以下的目的片段时延伸时间设为1 sec.，1 ~10 kb的目的片段时按5 sec./ kb设定可以得到清晰的扩增条带。
2.粗样品扩增
使用KOD OneTMPCR Master Mix，比较从血液、鼠尾裂解液（碱裂解液）分别扩增人β-globin基因和小鼠Thy-1基因结果。反应根据各PCR酶推荐条件进行，延伸时间5 sec./ kb。
结果显示，只有KOD OneTMPCR Master Mix能够得到明确的条带。
3.逆转录反应液（cDNA）的添加量对扩增的影响
逆转录反应液中残留的RNA对PCR有抑制作用，过量添加cDNA模板会使扩增效果变差。KOD OneTMPCR Master Mix不易受RNA的抑制作用。为了确认可引入的cDNA的量，通过加入不同量的cDNA模板，检测扩增TFR基因的效果。与原来的产品及其他公司的产品相比，即使添加较多的cDNA也能得到良好的扩增。
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